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如何融化胎牛血清讓實驗更好的完成

更新時間:2020-10-28  |  點擊率:832

胎牛血清是細胞培養(yǎng)中常用*的添加培養(yǎng)基。它營養(yǎng)豐富,大約含有三四百種不同成分,具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。本文締一生物為您分析如何融化胎牛血清讓實驗更好的完成。

 

做細胞培養(yǎng)實驗經(jīng)常會對血清凍融,怎么才能有效正確的利用血清也有對應(yīng)的方法,今天分析如何融化血清讓實驗更好的完成。

 

4℃過夜法相比,三步法為什么對血清更好呢?重點有二!

 

其一:關(guān)系到沉淀出現(xiàn)的幾率!

 

記得嗎?血清在融化過程中,瓶子里冰塊的底部你會看見亮亮的蛋白絲在下沉,如同蜂蜜溶于水時的亮線,這就是血清中大量的蛋白在快速融化,而水的熔點高于蛋白,融化的速度是比蛋白慢的。(回想一下高級冰淇淋和大棒冰的區(qū)別,你懂得?。┰囅?,如果采用4℃過夜的方法,1瓶500毫升的血清融化好,大約需要10小時左右,蛋白先融化,沉降在瓶子的底部,水融化的速度比蛋白慢,于是造成大量蛋白溶于少量的水,此時就很容易有一些蛋白飽和析出,(大多是脂蛋白和纖連蛋白),這就是血清融化中產(chǎn)生沉淀的重要原因之一。

 

采用三步法,只要2.5個小時,溫和有效地加快了水融化的速度,另一方面,融化過程中可以間斷輕輕搖擺瓶子,讓蛋白在瓶中混勻。此方法不但節(jié)約了時間,而且大限度減少了血清沉淀出現(xiàn)的幾率。

 

血清融化過程中,蛋白質(zhì)會比水先融化。冰塊底部亮亮的細絲就是融化中的蛋白

 

其二:血清在培養(yǎng)細胞中,重要的是利用它的活性的因子,因此,融化過程中大限度地保留因子的活性,就變得非常重要?;貞浺幌?,細胞復(fù)蘇時,要保持細胞的活性,我們是要遵循“快融”原則還是“慢融”原則呢?快融!血清同樣如此!三步法需要兩個半小時,4℃過夜需要大約10個小時(冰箱一般設(shè)2-8℃,所以各實驗室融化時間會稍有出入)。哪個速度對保留活性更好?不言而喻!

 

 

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